《使命召唤20》联动《沙丘2》 甜茶加入战区

肉桂醛又称桂皮醛，是斯里兰卡肉桂油、桂皮油、藿香油、风信子油和玫瑰油等精油的重要活性成分。

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（2）将第4点修订为只有符合本卫生规范和相关法律要求的食品补充剂方能投放立陶宛市场。因此，相关法规的修订调整，是尤为必要的。而在欧盟称为食品补充剂（Food Supplement），其源于欧盟《食品补充剂法令》，它的目的很明确，只是作为食物的补充。主要修订内容为：（1）增加每日使用的食品补充剂中钾的最大允许量不得超过1000mg。在加工的过程中可能会添加一些添加剂，这些添加剂有的是为了保鲜、有的是为了增加口感、有些是为了增加保质期等。

但是若把这个作为主要的方法，而忽视对健康食物、健康生活方式的选择，就显得本末倒置了。人们要生存，每天要进食不同的动植物类食物1.3.4 卵白蛋白消化产物对H2O2诱导的Caco-2细胞内ROS的清除作用细胞内ROS含量的测定采用文献中报道的DCFH-DA荧光探针法，并稍作修改。

这一结果与上述结果一致，说明经过体外模拟胃肠道消化，卵白蛋白被酶解，释放出新的抗氧化肽段，抗氧化肽段表现出更强的氧自由基吸收能力，并且分子质量越小的肽段，ORAC值越大将储备液于室温避光条件下静置12～16h后，用PBS将储备液稀释20～30倍，使其在734nm下的吸光度为0.70.02，形成ABTS工作液。评价生物利用度有体内和体外两类模型，体内主要是动物模型。加质量分数2%的胃蛋白酶（EC3.4.23.1，来源于猪胃黏膜，酶活力为3000units），用1mol/L的HCl将pH值调至2，保持体系温度在37℃，持续酶解90min。

将处于对数生长期的Caco-2细胞以2104cells/孔的密度接种于96孔板中，分别设置空白组、对照组和试验组，每个浓度6个复孔。二氧化碳培养箱，上海力申科学仪器有限公司。

1.3.2.2 卵白蛋白及其消化产物ORAC测定配制116nmol/L的荧光素钠溶液和40mmol/L的AAPH溶液。将酶解液离心，在4℃下10000r/min离心10min，收集上清液，-20℃贮存备用。计算ABTS自由基清除能力（%）的公式为：式中：A0空白组的吸光度。将处于对数生长期的Caco-2细胞以2104细胞/孔的密度接种于96孔板中，分别设置空白组、对照组和试验组，每个浓度6个复孔。

1.2 仪器与设备电子天平，瑞士METTLERTOLEDO公司。将体系沸水浴10min灭活蛋白酶，冷却至室温。以期阐明卵白蛋白经体外模拟胃肠道消化后抗氧化活性变化规律，为后续研究蛋白及其产物在体内消化、吸收提供理论依据。倒置生物显微镜，重庆奥特光学仪器有限公司。

研究表明，鸡蛋中多种蛋白具有抗氧化活性，其中，卵白蛋白作为蛋清蛋白的主要成分，约占54%，是一种由385个氨基酸组成的糖蛋白，含有6个具有二硫键的半胱氨酸残基，是唯一含有游离硫醇基团（SH）的蛋清蛋白，因而卵白蛋白能与自由基直接反应，从而具有较强的抗氧化活性。A1对照组的吸光度。

H2O2（分析纯），北京化工厂。相关链接：6-羟基-2，胃蛋白酶，荧光素，白蛋白声明：本文所用图片、文字来源《中国食品学报》，版权归原作者所有。

蛋白质主要分布在蛋清和蛋黄中，蛋清中蛋白以卵白蛋白、卵类黏蛋白、卵黏蛋白以及伴白蛋白等形式存在。Net，AUC按下述公式计算：1.3.3 卵白蛋白及其消化产物的细胞抗氧化活性1.3.3.1 卵白蛋白及其消化产物的毒性作用Caco-2细胞按照参考文献的方法进行培养。选取细胞存活率50%所对应的H2O2浓度为构建Caco-2细胞氧化损伤模型的最佳浓度。利用H2O2诱导Caco-2细胞氧化损伤，构建细胞氧化损伤模型，探究其体内抗氧化活性。卵白蛋白最终对人体的健康益处与其在体内的生物利用度密切相关。1.3.3.2 H2O2诱导Caco-2细胞氧化损伤模型的建立Caco-2细胞按照参考文献的方法进行培养。

人结肠癌细胞（Caco-2），中国科学院上海细胞库。A2试验组的吸光度。

称取10g卵白蛋白，加入1L蒸馏水配制成质量分数1%的蛋白溶液。在黑色96孔板中首先按如下设置加入溶液，空白组：120L荧光素钠溶液和20LPBS。

动物模型虽然能够真实地还原生理条件下的消化过程，但是存在以下问题：实验周期长，成本高，并且由于个体差异问题，容易造成结果的重复性差。如涉及作品内容、版权等问题，请与本网联系。

空白组加入80L的培养基，试验组和对照组加入80L细胞悬液，于37℃、5%CO2培养箱中孵育12h后，空白组和对照组加入10LDMEM无血清高糖培养基，试验组分别加入10L终质量浓度为0.01，0.1，1mg/mL的样品溶液，继续孵育12h后，空白组和对照组加入10LDMEM无血清高糖培养基，试验组加入10L终浓度为700mol/L的H2O2溶液，孵育6h后，利用MTS法测定细胞存活率。Liu等为改善姜黄素的功能特性，利用卵白蛋白制成卵白蛋白-姜黄素复合物，与纯姜黄素相比，复合物的抗氧化活性提高。评价卵白蛋白生物利用度的体外模型主要是体外模拟胃肠道消化模型，体外模拟消化能够在一定程度上模拟生理状况，并且试验易操作，成本低、周期短。低速离心机，安徽中科中佳科学仪器有限公司。

空白组加入80L的培养基，试验组和对照组加入80L细胞悬液，于37℃、5%CO2培养箱中孵育12h后，各组均加入10LDMEM无血清高糖培养基，继续孵育12h后，空白组和对照组加入10LDMEM无血清高糖培养基，试验组分别加入10L终浓度为400，500，600，700，800，900mol/L的H2O2溶液，孵育6h后，利用MTS法测定细胞存活率。空白组加入80L的培养基，试验组和对照组加入80L细胞悬液，于37℃、5%CO2培养箱中孵育12h后，空白组和对照组加入10LDMEM无血清高糖培养基，试验组分别加入10L终质量浓度为0.01，0.1，1mg/mL的样品溶液，继续孵育12h后，各组均加入10LDMEM无血清高糖培养基，孵育6h后，利用MTS法测定细胞存活率。

本试验以卵白蛋白及其体外模拟胃肠道消化产物为研究对象，探究卵白蛋白经体外模拟胃肠道消化后的抗氧化活性变化。1 材料与方法1.1 材料与试剂卵白蛋白、6-羟基-2，5，7，8-四甲基色烷-2-羧酸（6-hydroxy-2，5，7，8-tetramethylchroman-2-carboxylicacid，Trolox）、2-联氨-双-3-乙基苯并噻唑啉-6-磺酸（2，2-azino-bis（3-ethylbenzoth-iazoline-6-sulfonicacid），ABTS）、2，2-偶氮二异丁基脒二盐酸盐（2，2-azobis（2-methylpropi-onamidine）dihydrochloride，AAPH）、荧光素钠、细胞内ROS检测试剂盒等，美国Sigma公司。

测定其ABTS+清除活性和ORAC，评价体外抗氧化活性。1.3.2 卵白蛋白及其消化产物体外抗氧化活性测定1.3.2.1 卵白蛋白及其消化产物ABTS+清除能力测定配制7mmol/LABTS溶液和4.9mmol/L的K2S2O8溶液，将二者等体积混合配置得到ABTS储备液。

样品组：120L荧光素钠溶液和20L样品溶液（10g/mL）。黑色孔板（透明平底），德国GreinerBio-One公司。1.3.3.3 卵白蛋白及其消化产物对Caco-2细胞氧化损伤的保护作用Caco-2细胞按照参考文献的方法进行培养。96孔板按如下设置加入溶液：空白组：200LPBS、对照组180LABTS工作液和20LPBS以及试验组：180LABTS工作液和20L样品溶液（0.5，1，5和10g/mL），每组3个复孔。

目前对卵白蛋白抗氧化性的研究主要集中在酶解或改性前、后体外活性评价。Trolox组（标准品组）：120L荧光素钠溶液和20LTrolox溶液（1g/mL），混合上述体系，在37℃下预热2min后，快速加入60LAAPH溶液启动反应。

鸡蛋富含多种优质蛋白质，是人们餐桌上常见的蛋白质来源。多功能酶标仪，美国伯腾仪器有限公司。

超净工作台，苏州安泰空气技术有限公司。用1mol/L的NaOH调pH值至7，加入质量分数4%的胰液（EC3.4.21.4，来源于猪胰腺，酶活力为250units），保持温度37℃和pH7，持续酶解4h。